1、pm高速离心过夜培养的大肠杆菌（含有质粒）菌液1min
2、弃掉上清，留菌体，加100ul的溶液I，充分悬浮得到浑浊液
3、加入200ul的溶液II，轻柔颠倒20次，浑浊液澄清
4、加入150ul的溶液III，颠倒10次，出现块状白色沉淀
5、pm高速离心5min，转移上清液到新小离心管中
6、加入等体积（约300ul）的异丙醇，剧烈混匀，-20℃静置5min
7、pm高速离心5min，倒掉上清液，加入80%乙醇轻轻洗涤。
8、pm高速离心1min，倒掉上清。倒扣小离心管于吸水纸上，50℃烘箱中保温5min
9、加入20ul无菌双蒸水溶解，-20℃冷冻存贮